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编号 图片 名称 平台 状态 操作
162 Bio-Rad DuoFlow 中高压层析系统 动物遗传育种研究所公共实验室 可用 可预约 立即预约

预约历史

仪器编号 仪器品牌 仪器型号 仪器管理员 存放位置 基本费用 每小时费用
25 Bio-Rad Maximizer 刘贺贺 6-430 0.00 0.00

操作规范

操作规程:

1.       样品和缓冲液准备:用 HPLC 级试剂配制缓冲液和样品,并根据样品量选择合适的装置严格过滤和脱气。

2.       开机前检查仪器连接状态,一般为:缓冲液——泵头——混合器——进样阀——柱子——紫外检测器——电导检测器——pH 检测器——组分收集器,特殊配置参考仪器或相关部件操作手册仪器连接部分。

3.       用缓冲液充满管道:用10ml 注射器插入泵头正面柱塞孔,逆时针拧松柱塞,缓慢吸出液体直至没有气泡,拧紧柱塞。同样方法处理另外一个泵头。这时缓冲液即充满泵头。

4.       仪器开机前用注射器吸入去离子水,分别注入泵头上部两个小孔清洗泵头活塞后部,每个小孔至少清洗 10ml, 保持泵头活塞后部湿润,防止缓冲液中析出盐磨损泵头柱塞垫片或阻塞泵的运转。

5.       打开检测器(QuadTec 是独立电源)、收集器、层析仪电源开关,打开计算机,先启动 Biologic Configuration 检查泵头、收集器、层析工作站等的设置是否正确,然后启动 Biologic DuoFlow 软件。计算机会自动检测阀门、检测器等有关部件。

6.       根据所用柱子说明书提供的耐压极限设置泵的压力限制(但压力不要超过泵的最大压力范围,F10 泵头 3500psi, F40 泵头 1000psi),压力超过柱子的耐压极限会损坏柱子。

7.       如果使用 pH 检测器,每次使用前根据使用缓冲液 pH 范围用相应标准缓冲液(pH 4、pH 7 或 pH 7、pH 10)按软件校正程序进行校正。

8.       使用 Maximizer 时还要进行盐浓度的单点或两点校正(用精密 pH 计)。

9.       如果分离样品(特别是微量样品)需要收集,程序编制时注意设置延迟收集体积。

10.    用有关缓冲液清洗和平衡柱子,紫外(紫外灯本身需要一段时间稳定)和电导基线走稳后可以开始走样。

注意事项:

1.     层析泵没有溶液空转会磨损泵活塞,影响泵的精确性和泵的寿命。

2.     仪器使用过程中至少每天要洗涤一次,经常进行该操作会大大延长泵头寿命。关机时也要进行该操作,维持泵后洁净。

3.     上样前要把上样阀置于 load 位置,上样后在程序执行到 inject 步骤之前上样注射器不要拔掉,否则样品会因为重力缘故从上样阀废液出口流出。

4.     在上不同样品时,应特别注意清洗上样阀的 Load、inject、purge位置,避免样品的交叉污染。

5.     程序结束后注意熄灭紫外灯以延长其寿命。

6.     柱子使用完毕后应按柱子使用说明书有关程序彻底清洗或再生,并用合适的缓冲液保存,防止长菌和干涸。

7.     仪器使用完毕后如果放置过夜,应用低盐缓冲液(最好是去离子水)彻底清洗所有管道和阀门,包括缓冲液选择阀、Maximizer 的 4 个比例阀、上样阀、收集换向阀等的各个位置,防止盐析出堵塞管道、损坏泵头和阀门。

8.     仪器不可以在管道内是高盐缓冲液时放置过夜,高温天气尤其要注意。

9.     如果仪器一段时间不用,用去离子水清洗后(特别注意上样阀Load、inject、purge 沾染高浓度蛋白易长菌位置的清洗),再用 20%乙醇或 0.05%叠氮化钠溶液充满管道,长期不用要把泵、阀门、检测器等出入口用随机带的塞子(fittings)封闭以免溶液挥发。

10.  防止仪器管道阀门内部长菌或微生物,高温天气尤其要注意。长菌或微生物后很难除去。

11.  仪器存放应置干燥通风环境,防止仪器长霉菌或锈蚀。

12.  如果仪器放在低温环境(冷室或层析柜),不要关闭电源,防止水蒸气凝结。