动物医学院公共实验平台

小麦所公共实验室

营养所公共实验室

农业部西南作物生理生态与耕作重点实验室

中国海洋大学水产科学实验教学中心

中国海洋大学水产科学虚拟仿真实验教学中心

农学院公共科研实验平台

显示全部
编号 图片 名称 平台 状态 操作
149 通用突变检测系统 动物遗传育种研究所公共实验室 可用 可预约 立即预约
仪器编号 仪器品牌 仪器型号 仪器管理员 存放位置 基本费用 每小时费用
12 美国伯乐 变性梯度凝胶电泳(DGGE)1709080 王彦 6-428 0.00 0.00

仪器介绍

操作规范

操作规程:

1. 将提供的TygonTM tubing剪成两个 15.5 cm 和一个9 cm 长的管子,其余部分保存备用。长管子用于连接三通(Y-fitting)和两个分别装高、低浓度胶液的注射器,混合后的变性剂浓度梯度胶通过三通注入灌胶器。

2. 按照光盘演示装配玻璃板,隔条,胶垫,连通配件和灌胶器。平行DGGE、垂直DGGE、CDGE,TTGE的装法略有差异。

3. 按照说明书配制所需变性胶,推荐使用伯乐公司试剂(170-9710,17 -9171,170-9172或分别订货丙烯酰胺等试剂),注意使用新鲜配制的10%过硫酸铵溶液。试剂质量不高会导致凝胶不完全或不均匀。

4. 使用梯度形成仪灌胶。平行DGGE使用Top filling法、垂直DGGE使用bottom filling法,其他灌胶方法同平行DGGE。灌胶器上注明了Top filling和bottom filling两种方法高低浓度注射器摆放位置。

5. 胶凝后,拔出梳子,清洗胶面;装配电泳装置,确保缓冲液无渗漏。

6. 预电泳至缓冲液温度到具体实验要求后,停止电泳,上样后重新开始电泳。DGGE,TTGE,CDGE 使用恒压,SSCP使用恒功率条件电泳。

7. 电泳结束后,EB或银染成像。

8. 实验前请参阅使用说明书和操作光盘,常见问题在TroubleShooting 一章有总结。

注意事项:

1. 每位使用者应该仔细阅读操作说明书和操作演示光盘,在光盘指导下使用。

2. 温度控制模块要垂直方向轻拿轻放并认真放置到位,保护加热棒,搅拌器,泵和探头等部件。

3. 不论是需要暂停还是停止仪器运行,要注意既关闭电泳仪电源也关闭温度控制模块电源,避免加热棒干烧。

4. 即使只跑一块凝胶,也要两边都要用玻璃板形成封闭的上槽。

5. 上槽缓冲液务必没过铂金丝上方 1cm,下槽缓冲液不要超过最大限制高度。

6. 避免反复使用缓冲液。

7. 电泳之前要彻底清洗胶面以获得良好分辨率。

8. 使用后须彻底清洗全部组件并归类摆放,避免丢失小的配件。

9. 玻璃板要避免强酸碱腐蚀;灌胶灰垫等橡胶部件要及时清洗,避免缓冲液腐蚀造成老化。 10. 如果实验过程中出现任何异常现象,请随时联系伯乐公司。